评价体外诊断试剂的正确度是体外诊断产品研发与评价中的一个重要环节，旨在确保测量结果的可靠性和临床诊断价值。正确度是指测量值与真实值之间的一致性程度，主要评估系统测量误差或偏差。

体外诊断试剂正确度的试验设计主要包括以下几个方面：

1. 与有证参考物质（Certified Reference Material, CRM）或参考方法进行比对

   目的：通过将体外诊断试剂的测量结果与已知真实值的参考物质或参考方法进行比较，来验证产品的正确度。

   试验设计

   • 直接比对：使用体外诊断产品检测有证参考物质，并将测量结果与该参考物质的认证值进行比较，计算偏差和百分比偏差。

   • 间接比对：将参考物质与典型临床样品一同进行检测，比较结果并计算偏差和百分比偏差。

   • 要点：测量程序应符合国际标准和参考程序。

2. 回收实验（Recovery Experiment）

   目的：评估体外诊断试剂在不同浓度下对被分析物的测量能力是否准确，通过测定回收率来评价正确度。

   试验设计

   • 样品制备：向若干份（例如3-4份）不同浓度（低、中、高）的样品中加入已知量的纯被分析物。

   • 测量：使用待评价的体外诊断试剂测量加入被分析物的样品浓度。

   • 计算：计算回收率（R），通常要求每个浓度水平至少进行3次重复测量。

3. 方法学比对实验（Method Comparison Experiment）

   目的：将新开发的体外诊断试剂（待测方法）的性能与已验证的参考方法或市场上的现有方法（比较方法）进行比较，以确定两者之间的一致性，从而评价待测方法的正确度。这是评价正确度的常用方法。

   试验设计（通常参照CLSI EP09-A3和EP05-A3等文件进行）

   • 样品选择与数量

     应选择未经处理的临床样品，覆盖产品测量范围内的各个浓度水平。

     样品应具有代表性，能反映目标人群的特点。

     一般建议至少使用40份样品进行比对。对于免疫学诊断试剂，建议至少使用100份样品。

     如需评价异常离群值，可能需要增加样品数量，例如在20%的样品超出限值时，可能需额外增加样品至100或120份。

     样品应妥善保存，避免在测量前发生变化。

   • 测量操作

     测量应由经过培训的操作人员在校准过的仪器上进行。

     待测方法和比较方法的测量应在同一时间进行。

     通常对每个样品进行重复测量，例如重复测量2次或更多次。

     重复测量的次数可根据精密度要求确定。

   • 数据分析

     离群值检查：对数据进行离群值分析（例如Grubbs检验），以识别和处理异常数据。应调查离群值的原因，并在必要时考虑是否剔除。

     图示分析

   • 偏差图：绘制两种方法测量结果的差异（绝对或百分比）与比较方法测量结果（或平均值）的散点图，用于识别系统偏差和比例偏差。

   • 散点图：以比较方法的测量结果为x轴，待测方法的测量结果为y轴绘制散点图，直观评估两者的一致性。

     回归分析：采用合适的回归模型（如线性回归、加权线性回归、Deming回归或Passing-Bablok回归）来建立两种方法之间的数学关系。根据回归结果评估两种方法是否存在系统偏差或比例偏差。

     偏差计算：计算在整个测量范围内的偏差（绝对偏差或百分比偏差），并确定其95%置信区间，评估其临床可接受性。

4. 总体考量

• 整个正确度评价过程应科学合理、规范，并全程详细记录。

• 应充分参考和遵循相关的国家标准、行业标准以及国际指南文件（如CLSI EP09-A3）。

• 试验设计应充分考虑可能影响测量结果的各种因素，确保结果的可靠性和可溯源性。